Каталог статей

Токсичність у рифовому резервуарі: Чи знаєте ви?

Токсичність у рифовому резервуарі: Чи знаєте ви?

Токсикологія, або вивчення отрут та способів їх дії, може бути дуже важливим доповненням до підготовки будь-якого акваріуміста. Токсичність може бути викликана джерелами всередині акваріума або джерелами за межами акваріума. Ця дискусія проведе нас через багато найбільш важливих моментів, що стосуються рифових акваріумів та взаємозв’язку токсикології.

Ми всі знайомі з наявністю токсичних організмів у наших акваріумах або, принаймні, з можливістю їх появи. Огірки можуть спричинити вічно страшну “огіркову ядерну бомбу”, або ми можемо простягнути руку і виявити, що нас вкусила риба-кролик з лисячим обличчям. Але токсичність в наших резервуарах може мати різноманітні джерела. Вони можуть варіюватися від використання аерозолів або розчинників (таких як аміак, лак для волосся або аерозольні мастила) в безпосередній близькості від наших акваріумів до присутності в системі певних коралів, риб або водоростей, до сковорідки на кухні, яка час від часу задимлює весь будинок.

При обговоренні токсичності в наших акваріумах є кілька термінів, з якими ми всі повинні бути знайомі:

Тепер, коли у Вас є базовий набір визначень, я хотів би нагадати Вам, що дуже мало сполук, що представляють реальний інтерес в наших акваріумах, мають відомі токсичні значення (LC50 або інші). Єдині дані, які існують, як правило, отримані з реальних екосистем або закритих лабораторних систем. Кожен вид тварин, яких ми утримуємо, має різну сприйнятливість, різні механізми боротьби з образою та абсолютно різні реакції на присутність токсичних хімічних речовин. Каламутні естуарні системи матимуть зовсім інший результат щодо багатьох хімічних речовин, ніж незайманий риф. Організми з різних районів також мають широкий діапазон сприйнятливості. Більшість сполук, що обговорюються в цьому поточному контексті, будуть представлені лише в основних термінах і, як правило, надмірно спрощено. Значна частина того, що я представлю Вам, базується на органічних сполуках (органічна молекула – це молекула, що містить вуглець у своїй структурі), які були ретельно вивчені та змодельовані в різних середовищах, таких як пестициди та різні вуглеводні, тому, чи можна екстраполювати ці припущення на домашній акваріум чи ні, поки що невідомо. Однак, виходячи з консервативних міркувань, ми повинні розглянути найгірший можливий сценарій для збереження тварин, яких ми утримуємо.

Існує ряд фізико-хімічних властивостей окремих сполук, які дозволяють їм більше переміщатися в наші акваріуми з навколишнього середовища. Розчинність сполук у воді викликає першочергове занепокоєння. Деякі сполуки мають дуже сильну огиду до води, що заважає їм легко потрапляти в наші системи (гідрофобні або ліпофільні). Якщо сполука має надзвичайно високу розчинність у воді, це дозволить їй потрапити у воду в резервуарі, але часто перешкоджає проникненню токсину в організми через наявність клітинних мембран на основі ліпідів. (рис. 2) Однак, як і в більшості випадків, існують ускладнюючі фактори. Присутність різних органічних сполук і поверхнево-активних речовин у воді наших резервуарів фактично сприяє перенесенню деяких органічних сполук в наші резервуари. Це добре вивчено для органічних забруднювачів, таких як ПХБ, ПАУ та пестициди. Багато неорганічних забруднювачів і металів легко поглинаються (через малий розмір або наявність специфічних молекул-переносників на поверхні клітин). Загалом, ті токсиканти або токсини з помірними або помірно високими значеннями ліпофільності та незначним або нульовим іонним зарядом, найімовірніше, можуть спричинити проблеми в резервуарі та для наших тварин.

Іншою хімічною властивістю є тиск пари сполуки. Це безпосередньо пов’язано з розчинністю у воді через фактор, який називається законом Генрі (Рівняння 1). Більш високі значення H (значення закону Генрі) вказують на менший водний ризик. Тиск парів є мірою здатності сполук виходити з одного середовища (наприклад, води) у повітря. Специфіка взаємодії цих фізико-хімічних властивостей не буде розглядатися в цьому обговоренні для того, щоб зробити його більш зрозумілим. Якщо вам потрібна додаткова інформація, будь-який хороший підручник з хімії навколишнього середовища є чудовим джерелом, будь ласка, зверніться до посилань.

Рисунок 1 – Гіпотетична крива поглинання та депонування, заснована на тому, що тварину поміщають у забруднений резервуар, а потім переміщують у чисте середовище або піддають впливу, наприклад, розчинника, що використовується поблизу резервуара, який досягає піку, а потім знижується після використання.

Рівень рН наших резервуарів також є важливим моментом, який необхідно враховувати з точки зору токсичності. Багато сполук мають стан, який змінюється від іонного до неіонного навколо заданого рН. Цей факт робить деякі сполуки більш токсичними в рифовому акваріумі в порівнянні з прісноводним акваріумом з низьким рівнем рН. Ціанід є чудовим прикладом, оскільки він неіонізований (HCN) при низькому рН і іонізований (CN -) при високому рН (pKa 9,1, що означає 50% кожного з них при рН 9,1). Хоча ціанід у вигляді CN – є більш смертельним для риб, більша частка HCN буде присутня в акваріумі з рН 8,0. Як правило, іонізовані сполуки становлять меншу загрозу для живих систем, ніж неіонізовані, через пасивну проникність через мембрани, аміак у вигляді NH3 або NH4 + є яскравим прикладом. Деякі заряджені сполуки можуть імітувати ендогенні або необхідні субстрати (наприклад, свинець, що імітує кальцій) і легко поглинаються клітинами.

Проникнення токсинів або токсикантів в організм також сильно залежить від специфічних фізико-хімічних характеристик даного токсиканта. Здатність сполуки проходити через клітинну мембрану залежить від властивості, подібної до розчинності у воді, тільки в цьому випадку все навпаки. Зазвичай її називають ліпофільністю, вона є мірою того, наскільки сполука любить розчинятися в ліпідних мембранах або гідрофобних розчинниках. Ліпофільність зазвичай вимірюється як коефіцієнт октанол: вода (Kow). (Рівняння 2) Цей коефіцієнт розподілу є хорошим показником здатності сполук проникати в клітинні мембрани. Як і у випадку з розчинністю у воді, занадто великий потенціал розчинення в ліпідах призводить до того, що токсини застряють у клітинних мембранах і жирових відкладеннях і не мають великого значення для внутрішньої роботи клітини. Цей ефект розподілу може пояснювати деякі форми токсичності для клітин, хоча переважна більшість сполук зв’язується далеко від місця їх дії. Токсиканти або токсини з помірними або помірно високими значеннями ліпофільності, швидше за все, можуть викликати проблеми в резервуарі. Ліпофільність не є справжньою проблемою для неорганічних сполук, оскільки більшість з них регулюються різними механізмами і не мають пов’язаного з нею Kow.

Рисунок 2 – Схематичне зображення клітинної мембрани і типових органічних токсикантів від повністю гідрофільних до повністю гідрофобних. Ідеальний токсикант має певний ступінь розчинності у воді та ліпідах і не має іонного заряду. Слід зазначити, що багато неорганічних сполук не відповідають цьому прикладу.

Випадок потрапляння ліпофільних сполук у наші резервуари стає дещо складнішим, якщо врахувати, що знаходиться у воді. Дійсно ліпофільна або гідрофобна сполука теоретично не повинна потрапляти в систему; однак, наші резервуари мають значну кількість органічних речовин у товщі води. Ця органіка може слугувати транспортним засобом для цих сполук. Зв’язування органічних молекул одна з одною є загальним явищем, і органіка в наших резервуарах може включати поверхнево-активні речовини, а також залишковий мул, жирні кислоти та інші органічні побічні продукти коралів, риб або рослин, які легко служать транспортним середовищем.

Рівняння:

Рівняння 1: H = VP/S

Рівняння 2: KOW = концентрація в октанолі/концентрація у воді

Джерела токсикантів

Антропогенні джерела бувають у всіх формах: пари/аерозолі, гази, рідини та тверді речовини. Найбільше занепокоєння у середньостатистичного акваріуміста (за умови, що ніхто не кидає в акваріум копійки на удачу!) викликають пари/аерозолі. Вони можуть бути у вигляді пестицидів, розпилених в безпосередній близькості від акваріума (спреї, що застосовуються поза домом, виявляються всередині у вимірюваній кількості і протягом короткого проміжку часу, Leidy et al .) або великої кількості парів розчинника від фарбування або чищення. Більшість розчинників, що використовуються в побуті, мають незначну явну токсичність і навряд чи достатньо розчиняються у воді через дуже високий тиск парів, щоб потрапити в наші резервуари, але про їх вплив на безхребетних і риб відомо рідко, якщо взагалі відомо. Як правило, якщо на продукті є попередження щодо вентиляції або токсичності в контактній інформації, слід дотримуватися ще більш суворих правил, ніж для безпеки людини. Існують і більш віддалені джерела. Відомо, що сполуки, які виділяються при спалюванні викопного палива та відходів, є токсичними у великій кількості і зустрічаються повсюдно. Пестициди також можуть бути широко розповсюджені, хоча найбільше занепокоєння (у великих масштабах) викликають традиційні пестициди, які більше не використовуються. Одним з таких пестицидів є ДДТ, який ми всі носимо в собі в помітних кількостях. Існує, звичайно, занепокоєння і щодо газів, але загалом умови, за яких вони можуть виникати, є рідкісними, оскільки це також було б шкідливим для здоров’я людей. Високі концентрації оксиду вуглецю (CO) і діоксиду вуглецю (CO2) можливі в добре ізольованому будинку з газовими приладами. Вони матимуть такий самий вплив на мешканців вашого резервуару, як і на вас, а саме – задуха. У зв’язку з цим викликають занепокоєння такі розчинники для чищення, як відбілювач (гіпохлорит натрію) або аміак. Обидва вони є достатньо летючими та розчинними у воді. Це дає їм правильне поєднання характеристик, щоб бути токсичними для наших тварин. Будьте обережні та провітрюйте будинок під час прибирання цими засобами.

Метали також викликають занепокоєння в рифовому акваріумі. Ми всі знаємо, що не слід використовувати металеві аксесуари, оскільки вони піддаються корозії або іржавіють при контакті з солоною водою. Але ви можете не усвідомлювати, що багато металевих сплавів містять різні метали, які можуть “застрягти” в наших акваріумах через відсутність механізмів виведення. Наприклад, при цинкуванні зазвичай використовується цинк. Хоча деякі метали не є безпосередньо токсичними, вони можуть мати інші непрямі ефекти, такі як цвітіння водоростей при підвищеному вмісті заліза. У багатьох випадках обмеження поживних речовин насправді є не N або P, а Fe. Ми всі знаємо, що мідь може знищити популяції безхребетних. Ртуть також викликає занепокоєння. Хоча старі термометри рідко зустрічаються, в них використовувалася ртуть, і один-єдиний розбитий термометр в резервуарі може мати жахливі наслідки (зверніть увагу, що червона рідина в термометрах є спиртом і не настільки небезпечна, як срібна ртуть). Небезпека ртуті також поширюється на рифівника при контакті з водою. Я розгляну ртуть більш детально в одній з наступних статей. Метали та інші токсичні неорганічні молекули можуть накопичуватися через низьку якість вхідної води (миш’як є хорошим прикладом на заході та південному заході), падіння металевих предметів у резервуар і їх корозію, або з атмосфери.

Ще одним джерелом токсикантів, хоча дехто може назвати їх токсинами, є сам резервуар. Азотний цикл виробляє аміак, нітрити і нітрати, які є досить токсичними, хоча і через різні механізми, особливо в морському середовищі. Нітрити є найбільш токсичними на основі концентрації. Повністю циклічний і збалансований резервуар з достатньою кількістю середовища (тобто з бактеріально колонізованою поверхнею, наприклад, живим камінням і піском) є достатнім запобіжником для цих загроз.

Переміщення та очищення токсинів

Стійкість – це міра часу, протягом якого токсин або токсикант залишається в системі. З наукової точки зору, період напіврозпаду (t1/2) є фактичною мірою часу, необхідного для того, щоб 50% сполуки було видалено або перетворено в іншу форму. Деякі сполуки є відносно нестабільними і швидко розпадаються, тоді як інші мають високу стійкість до розпаду. Хорошим прикладом цього процесу є ДДТ. ДДТ – це вихідна сполука, інсектицид, що використовується для обробки полів. ДДТ розщеплюється до ДДЕ (і ДДД) за допомогою різних хімічних і біологічних процесів. ДДЕ набагато стабільніший за ДДТ (хоча обидва вони відносно стабільні, тому їх використання зараз є незаконним), так що вимірювання, проведені сьогодні, все ще можуть виявити кількість ДДЕ і лише сліди ДДТ, що залишилися від його історичного використання. На стійкість впливають перераховані вище механізми видалення та метаболізму/розпаду.

Хімічні процеси

Токсини в природних системах, чи то в естуаріях, чи то у відкритому океані, чи то в наших акваріумах, зазнають руху і трансформації. Існують як хімічні, так і біологічні механізми, які руйнують або видаляють ці сполуки. З хімічної точки зору, основними процесами видалення є фотоліз – енергія світлового випромінювання, що викликає розщеплення молекул; гідроліз – руйнування хімічних зв’язків шляхом приєднання молекули води; і окислення – процес видалення електронів, як правило, шляхом додавання груп, таких як молекули кисню, в хімічну структуру. Ці процеси, ймовірно, відбуваються в наших акваріумах (за умови, що інтенсивність ультрафіолету/світла достатня для фотолізу), допомагаючи видалити деякі менш стабільні органічні молекули. Для тих акваріумістів, які використовують озонові або ультрафіолетові стерилізатори, окислення може бути провідним механізмом усунення. Однак, розщеплення органічних молекул не завжди є корисним. Розбиті молекули можуть бути шкідливими самі по собі через підвищену реакційну здатність, але це виходить за рамки цієї статті.

Комплексоутворення може бути ще одним механізмом, який утримує токсиканти від шкідливого впливу в наших резервуарах. Мідь є чудовим прикладом. У регіонах, де існує високий ступінь майже аноксичного простору, наприклад, всередині живої породи і глибоко в піщаних пластах, мідь легко поєднується з сіркою, викликаючи осадження в тверду форму. Цей механізм використовується у водно-болотних угіддях під час біоремедіації. Однак це, ймовірно, не є основним джерелом видалення для наших резервуарів, оскільки в ідеалі ми підтримуємо високий рівень насичення їх киснем, а відношення площі поверхні до об’єму води є надто низьким.

Рисунок 3 – Шляхи надходження та елімінації для акваріумів та риб. Зелені стрілки позначають поглинання. Червоні стрілки – депонування (елімінація).

Біологічні процеси

Термін “біологічний” означає, що живі істоти проходять через певні цикли росту, народження, лактації, харчування та смерті. Кожен з них може відігравати певну роль у видаленні або розведенні токсикантів. Якщо навантаження на організм певного вуглеводню незмінне, а риба росте, то концентрація на одиницю маси тіла зменшується. Народження або відкладання ікри – це процес, за допомогою якого може бути втрачена велика кількість ліпофільного токсиканта. Риба, навантажена великими запасами глікогену та жиру (риба використовує м’язи як механізм зберігання, тоді як ссавці використовують жирові клітини), яка змушена голодувати через розмноження або міграційну поведінку, може спостерігати вивільнення сполук з цих запасів під час споживання їжі. Це може бути дуже шкідливим у випадку високоліпофільних сполук, оскільки вони раптово стають знову доступними і можуть спричинити пошкодження клітин. Діяльність, пов’язана з життям, може бути як корисною, як у випадку з виведенням токсинів, так і шкідливою, як зазначено вище.

Біологічні процеси, що призводять до розщеплення токсикантів або токсинів, використовують багато з тих же хімічних засобів, що перераховані вище. Основна відмінність полягає в тому, що організми мають набір ферментних систем для зміни та виведення цих сполук зі своїх клітин. Розглянемо такий токсикант, як фосфорорганічний інсектицид (хорошим прикладом є паратіон). Розчинність у воді достатня, щоб дозволити йому потрапити у воду вашого резервуару через повітря, що проходить над його поверхнею, і супутній контакт з органічними речовинами, що знаходяться у воді. Ліпофільність достатня, щоб дозволити сполуці потрапляти в організм або при прийомі всередину, або шляхом простої дифузії. Тепер, коли сполука знаходиться всередині клітини, як вона видаляється? Очевидно, що вона може просто дифундувати, але якщо вона активно вноситься всередину, що тоді? Вона мала всі характеристики, які дозволили їй накопичуватися в клітині, і ті ж самі характеристики дозволять їй залишатися в клітині. Захищаючись, клітина запускає в дію ряд ферментів, які дозволяють змінити або метаболізувати пестицид. Невеликі бічні групи додаються або видаляються, або молекула розщеплюється на менші частини. Ці змінені молекули тепер мають змінені властивості. Вони, як правило, більш розчинні у воді і мають ділянки, які дозволяють розпізнавати і виводити їх з клітини специфічними транспортерами. Це і є процес метаболізму та виведення. Саме ці процеси дозволяють організмам виживати в постійно мінливому світі, наповненому невідомими і потенційно токсичними сполуками. Існують також ситуації, коли ці сполуки не можуть бути легко виведені. У цьому випадку існує потенціал для біомагніфікації.

Рисунок 4 – Біомагніфікація. Збільшення концентрації токсикантів у тканинах на більш високих трофічних рівнях внаслідок поглинання з їжею порівняно з біомасою.

Так само, як і у випадку з екскрецією з окремих клітин, організми також здатні виводити токсини з організму. У ссавців жовчна система використовується для виведення сполук з кровотоку через печінку. Потім жовч витікає назовні в кишечник, де деякі сполуки реабсорбуються, а інші виводяться. Цей процес відбувається майже однаково у всіх хребетних тварин.

Рослини також можуть слугувати джерелом експорту: Зокрема, макроводорості, оскільки їх легко обрізати і фізично видалити з системи. Макрофіти, однак, не є добрим первинним джерелом усунення. Поглинання органічних речовин, як правило, обмежується меншими органічними сполуками, такими як цукор, амінокислоти, нуклеїнові кислоти, пептиди та різні інші. Для того, щоб рослини були ефективними в якості шляху ліквідації, бактерії та інші мікроорганізми повинні перетворити більші молекули в менші молекули. Ця послуга як вторинний експорт є корисною, але не в контексті детоксикації.

Іншою стороною біологічного метаболізму та елімінації є присутність бактерій і грибів. У більшості природних систем, і, ймовірно, в більшості рифових резервуарів, біомаса бактеріальних і грибкових популяцій набагато перевищує біомасу будь-якого іншого біологічного агента. Ці бактерії та гриби відповідають за низький залишковий рівень вільного оксиду азоту, а також виконують багато інших дуже специфічних і важливих функцій. Серед цих функцій – здатність перетворювати сполуки в мінералізований стан. Мінералізація – це процес, керований одним видом або багатьма видами, який полягає в тому, що хімічна речовина розкладається до найдрібніших компонентів, таких як H2O, CO2, O2тощо.

Пам’ятайте також, що наші рифові акваріуми не є відкритими системами з підтримкою густонаселених мангрових заростей або естуарних систем. Наші закриті системи, хоча ми намагаємося імітувати природні процеси, забороняють повну імітацію. Мікробна дія та рециркуляція поживних речовин допомагають нам у нашій спробі забезпечити оліготрофні води, хоча експорт залишається критично важливим. Яскравим прикладом необхідності механізмів експорту (а не тільки процесів трансформації) є бактеріальна рециркуляція кон’югованих токсинів. Хребетні тварини (і, ймовірно, інші вищі організми також) мають системи, як згадувалося раніше, для кон’югації токсинів, що допомагають усунути і зменшити токсичність деяких сполук. Ця система працює дуже ефективно для запобігання токсичності в організмі. Однак багато кон’югатів є субстратом для росту бактерій і відщеплюються від материнської молекули, тим самим звільняючи вихідний токсин від його зміненого стану і дозволяючи йому знову стати доступним для поглинання.

Механічні процеси

Хоча вищезгадані хімічні процеси відбуватимуться в наших резервуарах, є й інші засоби, за допомогою яких ми можемо усунути токсини і отруйні речовини, щоб зробити їх присутність менш шкідливою. Активоване вугілля добре функціонує в цьому відношенні. Відомо, що активоване вугілля зв’язує органічні молекули (зверніть увагу, що воно не допоможе з компонентами азотного циклу або багатьма іншими неорганічними сполуками). Воно зазвичай використовується для освітлення води, наприклад, для видалення жовтого забарвлення зі старих резервуарів. Молекули, які викликають пожовтіння води, є органічними відходами, як правило, великими органічними кислотами, які легко зв’язуються з активованим вугіллям. Вугілля витрачається, як тільки всі доступні ділянки покриваються цими органічними речовинами або на поверхні гранул утворюється біоплівка (бактеріальний килимок), що перешкоджає дифузії через пори. Вугілля є дуже корисним, легкодоступним і простим у використанні методом видалення дрібних органічних забруднень. Я настійно рекомендую хоча б час від часу використовувати вуглець для видалення відходів та інших вивільнених сполук, особливо тих, що виділяються коралами, які конкурують за простір у наших закритих системах.

Інший поширений метод видалення органічних речовин – за допомогою білкового скімера. Цей метод має багато з тих же властивостей, що і використання вуглецю, тільки за рахунок іншої хімічної взаємодії. Він використовує той факт, що органічні речовини прилипають одна до одної, за своєю функцією це той самий процес, що й активоване вугілля. Зрештою, це ще один чудовий механізм для видалення токсинів.

Висновки

На закінчення, я хотів би, щоб кожен прийшов з кращим розумінням того, що може впливати на наші танки. Ми всі або були причетні до цього, або знали когось, у кого “щось” сталося в танку, але так і не змогли виявити джерело проблеми. Пам’ятайте про наслідки використання аерозолів та інших побутових миючих засобів і розчинів поблизу Ваших акваріумів. Будьте розумними. Всі процеси, від входу до виходу, є динамічними. Цей рукопис має на меті ознайомити Вас з можливостями, але не забувайте, що динаміка системи може усунути джерела стресу ще до того, як вони матимуть очевидний ефект. Ось типові помилки, яких припускаються люди, і способи їх усунення:

Підводячи підсумок, токсин повинен мати три властивості, щоб викликати занепокоєння. По-перше, він повинен бути токсичним. Якщо сполука присутня, але не має токсичних наслідків, то вона не викликає особливого занепокоєння. По-друге, вона повинна бути доступною. Доступність включає в себе ліпофільність і тиск пари. Якщо сполука негайно покидає водне середовище, то вона не викликає особливого занепокоєння. По-третє, токсин повинен бути стійким. Якщо хімічна речовина має період напіврозпаду всього кілька хвилин, вона, швидше за все, не буде викликати занепокоєння.

Відновлення резервуару, який був забруднений токсином або отруйною речовиною, значною мірою залежить від конкретної сполуки. В основному, з будь-якими органічними сполуками найкраще боротися за допомогою активованого вугілля і підміни води. Заміна води служить для розведення більшості токсичних сполук, але пам’ятайте, що стрес може виникнути через зміни в навколишньому середовищі, які посилюють токсичні ефекти. Переконайтеся, що всі параметри відповідають поточним рівням акваріума. Вугілля діє як поглинач для сполук, позбавляючи їх активності проти ваших тварин. Як приклад, я бачив кілька випадків, коли голотурії, що харчуються піском (огірки), були атаковані силовими головками і випустили досить потужний токсин, який вражає хребетних тварин. Негайне використання вуглецю, здається, має вирішальне значення для порятунку риби, яка постраждала від токсину, хоча, якщо відбувається проковтування м’якоті огірка, можливості врятувати рибу майже не існує.

Хоча в цій статті розглядаються різні процеси, що стоять за потраплянням отруйних сполук в наші акваріуми, їх переміщенням і видаленням з акваріумів, в ній перераховані лише найпростіші приклади різних токсинів і токсикантів. У наступних статтях серії будуть розглянуті конкретні приклади, які мають більше відношення до наших домашніх акваріумів, включаючи риб, безхребетних, водорості та антропогенні сполуки.

Список використаної літератури

  1. Wright CG, Leidy RB, Dupree, Jr HE. “Хлорпірифос у повітрі та ґрунті будинків через вісім років після його застосування для боротьби з термітами”. Bull. Environ. Contam. Toxicol. 1994. 52:131-134
  2. МакКлінток JB, Бейкер BJ, Ред. Морська хімічна екологія. CRC Press, Бока-Ратон, штат Флорида. 2001
  3. Halstead, BW. “Отруйні та отруйні морські тварини світу”, 2-е видання. The Darwin Press, Inc. Принстон, Нью-Джерсі. 1988
  4. Ходжсон, Е. Сучасна токсикологія. Appleton & Lange. Норуолк, Коннектикут. 1994
  5. Meier, J. White, J. Eds. 2000. Посібник з клінічної токсикології тваринних отрут та отрут. CRC Press, NY. НЬЮ-ЙОРК.

Source: reefs.com

Exit mobile version