Застосування Обертового Магнітного Поля Для Сепарації Біологічної Рідини

Сепарація ефективно використовується для розподілу компонентів крові.

Суть сепарації дуже просто зрозуміти, якщо згадати, що кров складається з двох складових – клітин крові (Рис.1.5) і плазми.
У кожній складовій своє завдання – еритроцити несуть до клітин організму кисень і поживні речовини, а через плазму від клітин відокремлюються продукти життєдіяльності, так звані токсини.
Один з таких методів-це метод центрифугування:
В основі механізму такої сепарації лежить відмінність щільності еритроцитів від щільності лейкоцитів, тромбоцитів, плазми і різних домішок
Таким чином, швидкість сепарації залежить від щільності клітинних або рідинних складових оброблюваної крові. Еритроцити, частина нейтрофілів, метамиелоцитив і ретикулоцитів є найбільш “щільними” клітинними елементами. Тому вони через особливу пристрій дзвони осідають при
центрифугування, тоді як менш щільні клітини крові, плазма з розчиненим у ній вільним гемоглобіном, детрит, строма зруйнованих клітин і. т. п. – спливають і видаляються через спеціальні канали в мішок для відходів.
Процедура триває, поки спеціальні датчики не зафіксують рівень гематокриту 60 – 65%.
Тоді починається наступний етап – відмивання. У той же дзвін центрифуги з допомогою роликового насоса надходить середу, промиває – 0,9% розчин NaCl або розчин Рінгера.
Він омиває еритроцити і витісняє забруднену плазму. Повторюється центрифугування, чистячого середовище і плазма з антикоагулянтами і вільним гемоглобіном сепаруються і видаляються в мішок для відходів.
Процедура повторюється, поки всі небажані домішки не будуть видалені. Після цього відмиті, концентровані еритроцити з допомогою роликового насосу перекачуються в мішок для готової аутоеритромасы. Після розведення розчином Рінгера у співвідношенні 1:1 еритроконцентрат готовий до переливання пацієнту.
Переваги цього методу очевидні. Оскільки основна маса ускладнень реинфузия пов’язана з попаданням у кров’яне русло пацієнта аутоплазми, багатою небажаними домішками, то очищення реинфузата від подібної плазми рятує пацієнта від цих ускладнень Вимиваються не тільки рідкі домішки, але і детрит, микроагрегаты, строма зруйнованих клітин, значно знижує ризик микротромбоемболии.
В останні роки найбільш перспективним способом виділення клітин є магнітна сепарація. Створення нового способу виділення клітин актуально як для вдосконалення методів ідентифікації та сепарації субпопуляцій лімфоцитів в експериментальних умовах, так і при розробці нових имунодиагностичних панелей для різних форм гемобластозів.
Метою цього дослідження була розробка методики виділення популяції В-лімфоцитів з периферичної крові донорів за допомогою методу имунномагнитнои сепарації.

Протягом 1997-1998 р. в наших дослідженнях використовувалася кров 60 донорів Вітебської обласної станції переливання крові. Проведено три серії дослідів щодо виділення лімфоцитів з цільної крові, лейкоконцентрата, суспензії мононуклеарів. У розробленій нами методиці в основу виділення В-лімфоцитів покладено метод поділу клітин з поверхневим мембранним диференціальних антигенів за допомогою полістиролів (з включенням магнетиту) мікросфер. Мікросфери, розроблені на основі кон’югації моноклональних антитіл на поверхні магніточутливих микроносителе, вносили до мононуклеарів крові з розрахунку 1:10. У серії дослідів було встановлено, що оптимальною умовою зв’язування магніточутливих микроносителе з клітинами-мішенями (В-лімфоцити) є інкубація суміші при 4 ° С з плином часу 40 хв. Комплекси, що утворюються (магніточутливих микроносителе В-лімфоцит) виділяли за допомогою лабораторного сепаратора БЕЛСЕП-1. Після фіксації і забарвлення комплексів проводили облік реакції; позитивно пов’язаними вважали клітини, приєднали не менше трьох мікросфер. В результаті проведених досліджень було виявлено, що виділення В-лімфоцитів, що несуть поверхневі антигени, склав 19% від усієї популяції лімфоцитів крові, статистично достовірно відрізняється від контролю і відповідає даними зарубіжних авторів.

Використовуючи процес фільтрації крові – так званий плазмафорез, вчені навчилися вилучати цілком антитіла з крові пацієнтів перед трансплантацією.