Визначення загальної кількості ваших копеподів

Ви продаєте мішок копеподів (стручків), але ви застрягли між вибором. Компанія А заявляє про величезну кількість стручків, але її мішок практично прозорий. Пакет компанії Б виглядає багатообіцяюче, але в ньому настільки мала кількість стручків, що виникає питання, чи немає в ньому більше “наповнювачів”, ніж стручків. Занадто часто власники риб опиняються в темряві, коли справа доходить до того, щоб знати, скільки копеподів вони насправді отримують. Купуючи стручки, важливо пам’ятати, що живі стручки знаходяться в постійному циклі росту і можуть сильно відрізнятися за своїми розмірами (РИСУНКИ 1, 2 і 3), залежно від того, на якій стадії росту вони знаходяться. _{РИСУНОК 1: Зміни середнього розміру (мкм) від яйця до дорослої особини у Tisbe biminiensis та Tigriopus californicus (Pinto, Souza-Santos, & Santos, 2001; Powlik, Lewis, & Spaeth, 1997) 1 . Залежно від стадії розвитку ікринки, розмір її тіла може сильно варіювати. Ікра та копеподіти можуть продовжувати розвиватися через цикли росту під час зберігання та в акваріумі.}

_{РИСУНОК 2: Різниця в розмірах між копеподитом Tigriopus californicus (ліворуч) та дорослою особиною (праворуч) з лінійки Poseidon’s Feast при 40-кратному збільшенні. Пакети Poseidon’s Feast газопроникні та містять поживні речовини для максимального зростання стручків під час транспортування та зберігання.}

_{РИСУНОК 3: Різниця в розмірах між дорослою особиною Tigriopus californicus (ліворуч) та яйцем (синя стрілка; лізоване) з лінійки продуктів Poseidon’s Feast при 100-кратному збільшенні. Пакети Poseidon’s Feast газопроникні та містять поживні речовини для максимального зростання стручків під час транспортування та зберігання.}

Оскільки стручки мають потенціал для розвитку впродовж свого циклу росту – під час транспортування та зберігання або під час перебування в акваріумі – знання загальної кількості стручків є більш корисним, ніж просто наявність декількох великих розмірів стручків, що привертають Вашу увагу. Так, мішки компаній А та Б можуть містити однакову кількість стручків, але в одному з них може бути більше ікринок та копеподитів, а в іншому – більше зрілих стручків.

У цьому технічному документі ми ілюструємо один із способів оцінки кількості стручків, показуючи, як AlgaeBarn визначає щільність стручків у своїй лінійці суміші копепод Poseidon’s Feast.

_{1 Також AlgaeBarn, LLC, 2015}

ОЦІНКА КІЛЬКОСТІ КОПЕПОД [РЕЗЮМЕ]

Кількість стручків у контейнері можна оцінити, підрахувавши кількість стручків з невеликої вибірки і, за допомогою ряду пропорцій, розрахувавши оцінку кількості стручків у всій популяції (РИСУНОК 4). _{РИСУНОК 4: Загальний підхід до визначення оцінки кількості стручків. Вибірковий підрахунок з контейнера зі стручками зазвичай може бути безпосередньо використаний для оцінки загальної кількості стручків у популяції (зелені стрілки). За бажанням, розчин стручків можна спочатку сконцентрувати або розбавити перед підрахунком, якщо розчин є занадто світлим або густим, відповідно (помаранчеві стрілки). Коефіцієнт концентрації або розведення необхідно враховувати під час оцінювання.}

Слід використовувати складний світловий мікроскоп з принаймні 40-кратним збільшенням, який можна використовувати для візуалізації бобиків усіх розмірів – від науплій до дорослих особин. Важливо зазначити, що ці методи враховують лише видимі стручки. Оскільки яйця та науплії на ранніх стадіях розвитку копепод не враховуються, фактична кількість бобових може бути навіть більшою, ніж оціночна.

Оцінка щільності стручків

Спочатку слід перевірити розчин стручків, щоб переконатися, що він має оптимальну щільність – не занадто багато і не занадто мало стручків – для підрахунку. Після того, як розчин стручків добре збовтують, на предметне скло мікроскопа наносять 0,1 мл зразка; для цього можна використовувати шприц об’ємом 1 мл. При 40-кратному збільшенні весь зразок оглядають через обмежене поле зору окулярів, щоб оцінити щільність стручків.

Якщо використовуваний контейнер зі стручками занадто розбавлений (тобто ви бачите занадто мало стручків у зразку при 40Х; наприклад, менше 3 стручків/0,1 мл), то розчин слід сконцентрувати і врахувати фактор концентрації в оцінках; див. “Концентрування щільності стручків”. З іншого боку, якщо використовуваний контейнер зі стручками занадто щільний (тобто ви бачите занадто багато стручків у зразку; наприклад, більше 15 стручків/0,1 мл), то зразок слід розбавити і врахувати коефіцієнт розбавлення в оцінках; див. “Розведення щільності стручків”. Якщо ні концентрування, ні розведення не потрібно, то капсули готові до підрахунку; див. безпосередньо розділ “Підрахунок капсул зразка”. Перед тим, як перейти до будь-якого розділу, слід записати об’єм розчину стручка (в мл); для вимірювання можна використовувати градуйований циліндр (переконавшись, що при перенесенні туди і назад втрачається якомога менше стручків).

Зверніть увагу, що запропонована оптимальна щільність стручків 3-15 стручків/0,1 мл розчину зразка може бути хорошою відправною точкою, але в кінцевому підсумку оптимальна щільність буде заснована на кількості стручків/0,1 мл, яку Вам зручно відстежувати за допомогою мікроскопа.

КОНЦЕНТРУВАННЯ ЩІЛЬНОСТІ СТРУЧКІВ

Хоча гарною відправною точкою є концентрація в 2 рази, застосування наступного рівняння дозволить вам використовувати будь-який коефіцієнт концентрації: Одним із способів досягнення коефіцієнта концентрації 2 є фільтрування рівно 1/2 об’єму вихідного розчину (виміряного градуйованим циліндром) через сітчастий фільтр (наприклад, 50 мкм) – захоплення всіх стручків з одночасним видаленням рідини. Після того, як захоплені капсули були перенесені назад у розчин, що залишився, об’єм, що залишився (тепер концентрований об’єм) можна перевірити за допомогою градуйованого циліндра, який повинен бути на 1⁄2 менше початкового об’єму.

РОЗВЕДЕННЯ ЩІЛЬНОСТІ СТРУЧКІВ

Хоча гарною відправною точкою є розведення у 2 рази, застосування наступного рівняння дозволить вам використовувати будь-який коефіцієнт розведення: Розчин для стручків можна розбавити в 2 рази шляхом додавання чистої солоної води (питома вага 1,025) в контейнер для стручків, що дорівнює об’єму вихідного розчину (як виміряно градуйованим циліндром). Потім розведений об’єм можна перевірити за допомогою градуйованого циліндра, який повинен бути вдвічі більшим за початковий об’єм.

ПІДРАХУНОК ЗРАЗКІВ СТРУЧКІВ

На цьому етапі розчин стручків повинен мати ідеальну щільність для підрахунку, або в результаті концентрування (відповідно до “Концентрування щільності стручків”), або в результаті розведення (відповідно до “Розведення щільності стручків”), або тому, що він вже мав ідеальну щільність (відповідно до “Оцінка щільності стручків”).

Для того, щоб ефективно підрахувати стручки, їх необхідно спочатку знерухомити. Один із способів зробити це – змішати зразок стручків, що підлягає підрахунку, зі спиртовим розчином: після того, як розчин стручків добре збовтують, 0,1 мл зразка змішують з 20 мкл спирту, що переноситься піпеткою в мікроцентрифужну пробірку. Суміш спирту і зразка стручка розсіюється на предметному склі мікроскопа. Мета цього разу полягає в тому, щоб пройти і оглянути кожну частину зразка через обмежене поле зору окулярів, підрахувавши і записавши кількість кожних побачених стручків (в стручках/0,1 мл). Після завершення підрахунку предметний столик мікроскопа витирають і процес іммобілізації та підрахунку 0,1 мл зразка стручків повторюють ще кілька разів; проведення більшої кількості випробувань забезпечить більш точну загальну оцінку кількості стручків. При використанні методу відбору проб без заміни об’єм стручків і розчину, вилученого в кожному випробуванні, відносно всього об’єму контейнера настільки малий, що його вплив на загальну оцінку кількості стручків, ймовірно, буде несуттєвим.

ОЦІНКА ЗАГАЛЬНОЇ ЩІЛЬНОСТІ СТРУЧКІВ

Після завершення декількох випробувань з підрахунку кількості стручків у зразку, цифри будуть використані для розрахунку оцінки кількості стручків у всьому розчині стручків (РИСУНОК 5). _{РИСУНОК 5: Приклад розрахунків для визначення оцінки кількості стручків. Як показано з довільними числами, загальна оцінка кількості стручків/мішок може бути визначена з використанням пропорцій з кількістю стручків/0,1 мл. Наведений вище розрахунок показує сценарій, в якому розчин стручків концентрується перед підрахунком, щоб проілюструвати, як може бути використаний коефіцієнт концентрації. Приклади розрахунків для інших дослідів подібні до розрахунків для досліду 1.}

Для кожного випробування кількість стручків/0,1 мл (з “Підрахунку зразків стручків”) множать на 10 для обчислення кількості стручків/мл. Потім кількість стручків/мл множать на загальний об’єм розчину стручків (з розділу “Оцінка щільності стручків”, “Концентрування щільності стручків” або “Розведення щільності стручків”). Якщо розчин для обробки стручків був концентрований, то добуток [(кількість стручків/мл)(загальний об’єм розчину для обробки стручків)] ділиться на коефіцієнт концентрації; якщо розчин для обробки стручків був розбавлений, то добуток множиться на коефіцієнт розбавлення. Таким чином, кількість стручків/контейнер обчислюється для кожного випробування, і середня оцінка щільності стручків може бути розрахована шляхом знаходження середнього значення оцінок кількості стручків/контейнерів.

ВИСНОВОК

Купуючи стручки, ми часто з першого погляду звертаємо увагу на їхній великий розмір, часто не звертаючи уваги на різноманітність та кількість. Хоча розмір, безумовно, пропорційний вмісту поживних речовин, корисніше мати на увазі, що стручки мають значні відмінності в розмірах і зростання відбувається безперервно навіть під час зберігання. Таким чином, щільність популяції стручків є безцінним показником при визначенні загального вмісту поживних речовин у контейнері зі стручками. Використання методів, викладених в цій технічній записці, дозволить власникам риб приймати більш обґрунтовані рішення при покупці стручкових водоростей.

AlgaeBarn послідовно використовує ці методи, щоб забезпечити різноманітність і щільність стручків в кожному мішку Poseidon’s Feast.

_{Список використаної літератури}

_{1 Pinto, C., Souza-Santos, L., & Santos, P. (2001). Розвиток та динаміка популяції Tisbe biminiensis (Copepoda: Harpacticoida), вирощеної на різних раціонах. Аквакультура, 198(3-4), 253-267. doi:10.1016/S0044-8486(00)00582-2}

_{2 Powlik, J., Lewis, A., & Spaeth, M. (1997). Розвиток, довжина тіла та живлення Tigriopus californicus (Copepoda, Harpacticoida) в лабораторних та польових популяціях. Ракоподібні, 70(3), 324-343. doi:10.1163/156854097X00609}

AlgaeBarn, LLC

5900 E. 58th Avenue, Suite A Commerce City, CO 80022

www.algaebarn.com | Продажі: [email protected].

© 2015-2019 AlgaeBarn, LLC. Всі права захищені.

Взаємодія з читачами

Коментарі

1. Крісті Чемберс говорить 25 квітня 2019 року о 2:33 вечора

Цей блог був дуже цікавим та інформативним! Дякую вам, хлопці, за те, що ви вклали в це все! Я люблю вашу пристрасть !!! Ще один задоволений клієнт?

• Ной каже 7 серпня 2019 року о 6:36 вечора

• Стефан Бладен каже 28 серпня 2019 року о 5:43 ранку

Source: algaebarn.com